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液相色譜儀常規(guī)分析操作步驟及規(guī)程2024/10/25

液相色譜儀操作步驟（原文摘錄自網絡）：1)．過濾流動相，根據需要選擇不同的濾膜。2)．對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。3)．打開hplc工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。4)．進入hplc控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。5)．有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進樣閥，需要在manual菜單下，先點擊purge，再點擊start，沖洗時速度不要超過10ml/min。6)．調

液相色譜常見故障的斷定及解決2024/10/25

診狀可能的原因解決方法(一)保留時間變化1.柱溫變化柱恒溫，必要時需配置恒溫箱2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動相平衡柱3.緩沖液容量不夠用25mmol/L的緩沖液4.柱污染每天沖洗柱5.柱內條件變化穩(wěn)定進樣條件,調節(jié)流動相6.柱快達到壽命采用保護柱(二)保留時間縮短1.流速增加檢查泵,重新設定流速2.樣品超載降低樣品量3.鍵合相流失流動相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向4.流動相組成變化防止流動相蒸發(fā)或沉淀5.溫度增加柱恒溫(三)保留時間延長1.流速下降管路泄漏,更換泵密封

液相色譜儀(hplc)的保養(yǎng)2024/10/25

1．HPLC的日常操作條件：溫度：10—30℃；相對濕度2．泵的保養(yǎng)：1)使用流動相盡量要清潔；2)進液處的沙芯過濾頭要經常清洗；3)流動相交換時要防止沉淀；4)避免泵內堵塞或有氣泡;3．進樣器的保養(yǎng)：1)每次分析結束后，要反復沖洗進樣口，防止樣品的交叉污染；4．柱的保養(yǎng)：1)柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動；2)當柱子和色譜儀聯(lián)結時，閥件或管路一定要清洗干凈；3)要注意流動相的脫氣；4)避免使用高粘度的溶劑作為流動相；5)進樣樣品要提純；6)嚴格控制進樣量；7)每天分析工作結束后，要清

液相色譜儀的幾個使用問題2024/10/25

1.色譜柱中的流動相會排干嗎？不少做色譜分離試驗的人遇到過這樣的情形：不慎未及時補充流動相，泵將溶劑瓶中的流動相吸干了，HPLC系統(tǒng)由此而停止工作了。如此情況是否會損壞色譜柱？泵是否已將色譜柱中所有流動相都排干了？色譜柱還能使用嗎？事實上，如果泵將溶劑瓶中的流動相吸干，并不會造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣，泵也不會將空氣排入色譜柱。因為泵只能輸送液體，而不能輸送空氣。相比之下，另一個更可能發(fā)生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣，整個色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生

色譜常見問題問答2024/10/25

問：用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移，有時發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?答：關于漂移問題：1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定2、流動相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應等3、柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡關于快速變化問題1、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩(wěn)定2、泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。3、流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合問：色質聯(lián)用中毛細柱的選擇應注意什么問題?答：1、柱效要

毛細管分析常見問題的解決2024/10/25

一、峰丟失可能的原因及應采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器驗證。2.未接入檢測器，或檢測器不起作用，檢查設定值3.進樣溫度太低，檢查溫度，并根據需要調整4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據需要調整5.無載氣流，檢查壓力調節(jié)器，并檢查泄漏，驗證柱進品流速6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進口端或檢測器末端，是可以補救的，切去柱斷裂部分，重新安裝二、前沿峰1.柱超載，減少進樣量2.兩個化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進樣量，使溫度降低10~20度，以使峰分開3.樣品冷凝，檢查進樣口和柱溫，如有必要可升

氣相色譜柱的安裝2024/10/25

色譜柱的正確安裝才能保證發(fā)揮其的性能和延長使用壽命。正確的安裝請參考以下步驟：步驟1.檢查氣體過濾器、載氣、進樣墊和襯管等檢查氣體過濾器和進樣墊，保證輔助氣和檢測器的用氣暢通有效。如果以前做過較臟樣品或活性較高的化合物，需要將進樣口的襯管清洗或更換。步驟2.將螺母和密封墊裝在色譜柱上，并將色譜柱兩端要小心切平步驟3.將色譜柱連接于進樣口上色譜柱在進樣口中插入深度根據所使用的GC儀器不同而定。正確合適的插入能zui大可能地保證試驗結果的重現(xiàn)性。通常來說，色譜柱的入口應保持在進樣口的中下部，當進樣針

原子吸收分光光度計火焰的基本特性2024/10/25

一、火焰的燃燒特性著火極限，著火溫度和燃燒速度是火焰的燃燒特性，常統(tǒng)稱為火焰三要素。對于一個特點的燃氣和助燃氣混合氣體，只有燃氣在該混合氣體中的百分含量處于某一范圍內，燃燒才能開始，并擴展到個混合氣體中，形成火焰。此燃氣的含量的上下限稱為著火極限。在著火極限內，燃燒能夠自發(fā)地擴展到整個混合氣體的zui低溫度，稱為著火溫度?？扇蓟旌蠚怏w的某一點，其溫度一但達到著火溫度就開始燃燒，由于熱傳導作用，燃燒反應的混合氣的這一點將傳播到鄰近氣層，若初始反應產生的熱量除了補償由于熱傳導和輻射造成的損失外，還能

使用毛細柱分析的注意事項2024/10/25

1、無載氣通過時，柱的固定液熱分解較迅速。所安裝調試人員和培訓工程師定會對操作人員強調：在柱箱（爐）升溫前一定要先通上載氣（這與TCD操作要求相似），在柱箱冷卻后方能關載氣。2、載氣中若夾帶灰塵或其它顆粒狀物體就可能導致色譜柱迅速損壞，同時還應注意不能讓微?；蚧覊m進入汽化室，因此在載氣進入儀器管路前必需凈化器；3、載氣中的水分通過固定液的液膜吸附在體內表面上，將會取代或破壞固定液液膜，所以，固定液極性越強，越需要采用干燥的載氣，例如：象OV-1、SE-30、SE-54、OV-101對載氣干燥要求

色譜基礎2024/10/25

1、氣相色譜法（GC）—gaschromatography用氣體做為流動相的色法。2、氣液色譜法（GLC）—gasliquidchromatography將固定液涂在載體上作為固定相的氣相色譜法。3、氣固色譜法（GSC）—gassolidchromatography用固體（一般指吸附劑）作固定相的氣相色譜法。4、程序升溫氣相色譜法—programmedtemperaturegaschromatography色譜柱按照預定的程序連續(xù)地或分階段地進升溫的氣相色譜法。5、反應氣相色譜法—reactio

液相色譜柱安裝與使用說明2024/10/25

液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用，是液相色譜工作的關鍵；也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實驗數(shù)據的必經之路。一、液相色譜柱的安裝：1、液相色譜柱的結構：a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成。柱接頭采用低死體積結構，柱接頭是兩端螺紋組件，一端是為7/16英寸外螺紋，另一端是3／16英寸的內螺紋(國內外已規(guī)范化)。7／16英寸外螺紋與1／4英寸柱管(Φ6.35mm)連接，中間放置壓壞用于密封。3／16英寸的內螺紋與1／16英寸(Φ1.57mm)的

氣相色譜常見故障檢查診斷2024/10/25

氣相色譜種類很多，性能也各有差別。主要包括兩個系統(tǒng)。即氣路系統(tǒng)和電路系統(tǒng)。氣路系統(tǒng)主要有壓力表、凈化器、穩(wěn)壓閥、穩(wěn)流閥、轉子流量計、六通進樣閥、進樣器、色譜柱、檢測器等；電子系統(tǒng)包括各用電部件的穩(wěn)壓電源、溫控裝置、放大線路、自動進樣和收集裝置、數(shù)據處理機和記錄儀等電子器件。要分析和判斷色譜儀的故障所在，就必須要熟悉氣相色譜的流程和氣、電路這兩大系統(tǒng)，特別是構成這兩個系統(tǒng)部件的結構、功能。色譜儀的故障是多種多樣的，而且某一故障產生的原因也是多方面的，必須采用部分檢查的方法，即排除法，才可能縮小故障

應該選擇什么規(guī)格的PEEK管？2024/10/25

通常在整個HPLC系統(tǒng)中，使用.010"ID×1/16"OD的管子是很安全的。使用.010"ID的管子，一般使用的管長度下壓降可忽略不計，而且，該內徑連接管導致的譜帶展寬可以忽略。Upchurch該規(guī)格PEEK管顏色為自然色或藍色（1531和1531B）。用1.8mmOD的管子取代一些藥物系統(tǒng)中使用的含氟聚合物管子。Agilent1100系統(tǒng)在高壓流路中使用新的1/32"OD的管子。PEEK管還有其它尺寸，一般長度為50′和100′。一個主要的制藥公司的獨立研究報告顯示將柱后通道由熔融石英管轉換

制備型液相色譜儀選購指南2024/10/25

制備泵P230P型恒流泵流量范圍：0.10-40.00mL/minzui高工作壓力：30MPaP270型恒流泵流量范圍：1.0-50.5mL/minzui高工作壓力：20MPaP280型恒流泵流量范圍：3-300mL/minzui高工作壓力：20MPa檢測器UV230+型紫外可見檢測器波長范圍：190-720nm可配不同體積的檢測池，供制備用。UV200Ⅱ型紫外可見可變波長檢測器波長范圍：190-600nm可配不同體積的檢測池，供制備用。色譜柱提供Hypersil、Spherisorb、Sino

如何選擇保護柱2024/10/25

怎樣選擇保護柱，但又不影響分離分析？這是色譜工作者經常提出的一個問題。通常，在選擇保護柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對于大部分分析工作者來說，一只1cm長的保護柱便能提供充分的保護作用。但是，如果樣品非常不清潔，或工作中發(fā)現(xiàn)要經常更換1cm的保護柱，那么就應選擇2cm或3cm長的保護柱。保護柱越長，自然所裝填的色譜填料越多，則其越能避免污染物進入分析色譜柱的機會。當然，隨著保護柱的長度加長，樣品的保留時間會比使用短保護柱長。一般來說，保護柱的內徑與分析色譜柱的內徑相同或相當即可。保護柱的填料

如何解決色譜柱使用過程中出現(xiàn)的問題2024/10/25

一、保留值與分離度重現(xiàn)性不好原因分析問題原因表現(xiàn)不同色譜柱間差異使用期間柱變化填料、鍵合相不同柱床破壞鍵合相丟失硅膠基質溶解強保留組分堆積堵塞保留因子(k),分離因子(a）柱效(N）保留因子(k),分離因子(a）柱效(N)保留因子(k),柱效(N)柱外效應系統(tǒng)差異、進樣量大、進樣閥與色譜柱之間、色譜柱與檢測器之間的管路太長、檢測器流通池體積大、接頭死體積大等。柱效(N)分離效果變差流動相組分改變流速改變溫度改變保留因子(k)，柱效變化很小保留因子(k),分離因子(a)保留因子(k),柱效變化很小

怎樣選擇色譜柱2024/10/25

現(xiàn)代液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。一．硅膠基質填料：1.正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica）以及其它具有極性官能團,如胺基團（NH2,APS）和氰基團（CN,CPS）的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其它極性基團極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中各組份的極性大小，即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低，如：正己烷（Hexane

一般選擇載氣的依據是什么？氣相色譜常用的載氣有哪些？2024/10/25

作為氣相色譜載氣的氣體，要求要化學穩(wěn)定性好；純度高；價格便宜并易取得；能適合于所用的檢測器。常用的載氣有氫氣、氮氣、氬氣、氦氣、二氧化碳氣等等。

載氣為什么要凈化？應如何凈化？2024/10/25

所謂凈化，就是除去載氣中的一些有機物、微量氧，水分等雜質，以提高載氣的純度。不純凈的氣體作載氣，可導致柱失效，樣品變化，氫焰色譜可導致基流噪音增大，熱導色譜可導致鑒定器線性變劣等，所以載氣必須經過凈化。一般均采用化學處理的方法除氧，如用活性銅除氧；采用分子篩、活性碳等吸附劑除有機雜質；采用矽膠，分子篩等吸附劑除水分。

試樣的進樣方法有哪些？2024/10/25

色譜分離要求在zui短的時間內，以“塞子"形式打進一定量的試樣，進樣方法可分為：１、氣體試樣：大致進樣方法有四種：（１）注射器進樣，（２）量管進樣，（３）定體積進樣，（４）氣體自動進樣。一般常用注射器進樣及氣體自動進樣。注射器進樣的優(yōu)點是使用靈活，方法簡便，但進樣量重復性較差。氣體自動進樣是用定量閥進樣，重復性好，且可自動操作。２、液體試樣：一般用微量注射器進樣，方法簡便，進樣迅速。也可采用定量自動進樣，此法進行重復性良好。３、固體試樣：通常用溶劑將試樣溶解，然后采用和液體進樣同樣方法進樣。也有